一、水質(zhì)微生物及指示菌
在各種水體,特別是污染水體中存在有大量的有機(jī)物質(zhì),適于各種微生物的生長,因此水體是僅次于土壤的第二種微生物天然培養(yǎng)基。水體中的微生物主要來源于土壤,以及人類的動物的排泄物及污染。水體中微生物的數(shù)量和種類受各種環(huán)境條件的制約。
一般認(rèn)為,水中微生物以革蘭氏陰性桿菌占有較大優(yōu)勢。與其他水體相比,河水及溪水中革蘭氏陽性菌相對較多,這是因為陸地微生物沖洗污染的緣故。
水體中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物,大部分是從外界環(huán)境污染而來,特別是人和其它溫血動物的糞便污染。水中常見的致病性細(xì)菌主要包括:志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、小腸結(jié)炎耶爾森氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等。
在實際控制中,對水質(zhì)衛(wèi)生質(zhì)量的評價和控制,是無法對各種可能存在的致病微生物一一進(jìn)行檢測,而一般利用對指示菌的檢測和控制,來了解水體是否受到過人畜糞便的污染,是否有腸道病原微生物存在的可能,從而評價水的質(zhì)量,以保證水質(zhì)的衛(wèi)生安全。
二、水質(zhì)微生物檢測方法
GB5749-85活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗法提供了水質(zhì)中細(xì)菌總數(shù)和總大腸菌群的檢測方法。
(一)細(xì)菌總數(shù)的檢測:
國家標(biāo)準(zhǔn)中,細(xì)菌總數(shù)是指1ml水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,于37℃經(jīng)24h培養(yǎng)后,所生長的細(xì)菌菌落的總數(shù)。
對生活飲用水,直接吸取1ml水樣于平皿中,加入營養(yǎng)瓊脂后混勻,37℃培養(yǎng)24h,進(jìn)行計數(shù)。
對水源水,根據(jù)情況對樣品進(jìn)行10倍梯度稀釋,選擇適宜稀釋液1ml,加注平皿,營養(yǎng)瓊脂混勻,37℃培養(yǎng)24h,進(jìn)行計數(shù)。
按照規(guī)定格式報告每毫升水中細(xì)菌總數(shù)。
(二)總大腸菌群的檢測:
國家標(biāo)準(zhǔn)中,利用總大腸菌群作為糞便污染的指標(biāo)。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的,37℃生長時能使乳糖發(fā)酵,在24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數(shù)的含量,表明水被糞便污染的程度,而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。
國家標(biāo)準(zhǔn)提供了多管發(fā)酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。
多管發(fā)酵法檢測總大腸菌群,分為三步:初發(fā)酵試驗,平板分離,復(fù)發(fā)酵證實試驗。初發(fā)酵試驗,采用乳糖蛋白胨培養(yǎng)液37℃培養(yǎng)24h,觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況。對陽性管培養(yǎng)物,接種于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基,觀察菌落特征,并進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落,接種于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,進(jìn)行復(fù)發(fā)酵證實試驗,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)所附檢數(shù)表報告結(jié)果。
其中,對生活飲用水,初發(fā)酵試驗接種水樣總量300ml,即100ml接種2管,10ml接種10管,采用兩個稀釋度,12支發(fā)酵管。對水源水,初發(fā)酵試驗接種水樣總量55.5ml,即10ml接種5管,1ml接種5管,0.1ml接種10管,共采用三個稀釋度,15支發(fā)酵管。兩種接種方法,所用的檢數(shù)表是不同的。
濾膜法檢測總大腸菌群,就是利用微孔濾膜,過濾一定量水樣,將水樣中含有的細(xì)菌截留在濾膜上,然后將濾膜帖放在選擇性培養(yǎng)基上(如品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基),經(jīng)培養(yǎng)和證實試驗后,直接計數(shù)濾膜上生長的典型大腸菌群菌落,并計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數(shù)。